多房棘球绦虫重组Bb-Em14-3-3疫苗的构建及其表达效率

目的构建多房棘球绦虫(Em)重组双歧杆菌(Bb)-Em14-3-3疫苗,并研究Em14-3-3分子在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达效率。方法通过PCR扩增Em14-3-3抗原编码基因;将该基因定向克隆于含有谷胱甘肽-S-转移酶(GST)基因的大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT,构建重组质粒pGEX-Em14-3-3;用电穿孔法将该质粒导入Bb,构建多房棘球绦虫重组Bb-Em14-3-3疫苗。经PCR和酶切鉴定后以IPTG诱导表达Em14-3-3/GST融合蛋白;SDS-PAGE及Western blot对表达产物进行鉴定。结果PCR成功扩增出530 bp的Em14-3-3基因;双酶切证实Em14-3-3基因插入pGEX-1λT中;PCR证实重组Bb-Em14-3-3疫苗构建成功;SDS-PAGE及Western blot分析显示重组质粒转化宿主菌在IPTG诱导下高效表达了Em14-3-3/GST融合蛋白,表达效率为23%。结论成功构建了多房棘球绦虫重组Bb-Em14-3-3疫苗,重组质粒pGEX-Em14-3-3在大肠杆菌中获得了高效表达,Western blot结果提示表达出的Em14-3-3重组蛋白具有特异抗原性。     

连续配筋混凝土加铺层研究

介绍了旧水泥混凝土路面上连续配筋混凝土加铺层的结构型式、端部锚固结构以及施工技术,以为连续配筋混凝土路面在旧水泥混凝土路面加铺中的应用提供参考。     

关于公路建设项目经济评价的几点思考

经济评价是通过财务评价和国民经济评价,分析项目的经济合理性和财务合理性,并作为项目是否建设的重要决定要素之一。交通量预测、评价指标的选取、征地补偿费用与土地机会成本、国民经济效益等计量的正确与否将直接影响项目经济评价的结果。     

城市轨道交通板式道床施工技术

通过对广州市轨道交通4号线轨道工程板式道床施工工艺的分析,介绍了板式道床的测量、轨道板调整和ZH砂浆控制等技术.工程严格按照操作程序施工,取得了良好的社会和经济效益,此次施工实践对类似工程提供了一定的借鉴意义.     

如何作好建设工程竣工结算审核工作

工程竣工结算系指施工企业按照合同规定的内容全部完成所承包的工程,经验收质量合格,并符合合同要求之后,向发包单位进行的最终工程款结算.     

软件技术专业校企合作办学模式的探索与实践

高职院校办学必须立足于培养动手能力强,能迅速适应劳动岗位的高技能型IT人才。本文结合校企合作办学模式的背景和发展现状,从实训中心建设,师资队伍建设和教学内容改革等三个方面阐述软件技术专业校企合作办学模式的新思路。     

钢管混凝土拱桥施工控制研究

钢管混凝土系杆拱桥是我国近年来桥梁发展史上的一种新颖结构,具有自重轻、承载大、抗变形能力强的优点,在现代桥梁中处于有利的竞争地位.本文以宁波慈城大桥为依托,对该桥施工过程进行了分析,并采取必要的施工监控手段,使整个桥梁施工过程中受力和变形都处于理想状态中.     

顶管微型隧道工程质量保证体系分析

顶管微型隧道工程作为一种特殊施工工艺,影响其工程质量的因素很多,如何确保工程质量是当前研究的热点之一。从质量保证体系措施及管理、质量控制与进度控制等方面,讨论了顶管微型隧道施工中质量保证措施,可供同类工程参考。     

强夯法施工与控制

强夯法适用于处理碎石土、砂土及低饱和度的粉土与黏性土、湿陷性黄土、杂填土和素填土等地基。对高饱和度的粉土与黏性土等地基,应采用在夯坑内回填块石、碎石或其他粗颗粒材料进行强夯置换,并通过现场试验确定其适用性。结合工程实践,对强夯法施工中地基处理及质量检测控制进行了探讨,对强夯法的施工要求、方法及检验进行了分析。     

混凝土桥梁施工中裂缝产生原因浅析

混凝土最主要的缺点是抗拉能力差,容易开裂.混凝土开裂可以说是"常发病"、"多发病".其实,如果采取一定的措施,在施工过程中产生的很多裂缝是可以克服和控制的.